Rendeltetésszerű használat

Átírás

1 TERMÉKINFORMÁCIÓ

2 Rendeltetésszerű használat Az A1cNow+ teszt a glikált hemoglobin százalékos (%A1C) szintjét határozza meg kapillárisokban (ujjbegy) vagy vénás teljes vérmintákban. A teszt a glikémiás szabályozás professzionális megfigyelésére való cukorbetegség esetén. Összefoglaló és magyarázat A vér magas glükóz szintje a proteinek fokozott glükozilálódásához vezet az egész testben, beleértve a hemoglobinokat is. A hemoglobin glükozilálódása megtörténhet az alfa és béta láncok amino termináljain, valamint más szabad amino csoporttal ellátott helyeken. A hemoglobin A lassú glükozilálódáson esik át, ami függ a vércukorszint átlagos szintjétől a vörös vérsejt kb. 120 napos életciklusa alatt. A leggyakoribb és legjellemzőbb fajtái a glikált hemoglobinnak az A és az A1C, amelyek körülbelül 3-6%-át teszik ki egy egészséges szervezet teljes hemoglobin tartalmának. 1 Az A1c és a vércukorszint kölcsönhatása egy nagyon jó módszer a cukorbetegek szervezetében mért vércukorszint hosszú távú megfigyelésére. 2 Korábbi tanulmányokban - például a Diabetes Control and Complications Trial (DCCT) és a United Kingdom Prospective Diabetes Study (UKPDS) a glikált hemoglobinokat az átfogó glikémiás szabályozás mérésére használták fel. Ezek és más tanulmányok kimutatták, hogy a szigorú glikémiás szabályozás kapcsolódik más, a diabetesszel kapcsolatos szövődményekhez (pl. látás, szívés érrendszeri problémák és veseelégtelenség). 3 A National Glycohemoglobin Standardization Programot(NGSP) azért hozták létre, hogy biztosítsa a hemoglobin A1C (A1C) eredményeinek követhetőségét a DCCT számára. A kutatások közvetlen kapcsolat felfedezéséhez vezettek a %A1C és az átlagos vércukorszint (MBG) között. Minden 1%-os változás az A1C-ben megközelítőleg 30mg/dl-es változás az átlagos vércukorszintben. A formula, amelynek segítségével kiszámolható az átlagos vércukorszint az A1C szint ismeretében a következő: MBG = (31.7 HbA1c) Átlagos plazma glükózra (MPG) váltáshoz az MPG = MBG 1.11 képlet használatos. A1C-t különböző módokon lehet mérni és az utóbbi évtized alatt elérhetővé vált az ellátás helyén való vizsgálat. A helyi vizsgálatok jól használhatóak az orvosi rendelőkben és klinikákon, mert könnyen végrehajthatóak, nem szükségeltetnek laboratóriumi felszerelések és nagymértékben lerövidítik a mintavételezéstől az eredmény megjelenéséig tartó időt. Az azonnali eredmény a kezelését hatásfokát növeli. A vizsgálat elve A METRIKA cég kidolgozott egy technológiát MODM (Micro-Optical Detection Method) néven, amely egyesíti a mikroelektronika, az optika és a száraz reagens kémiai csíkok technológiáját egy újrafelhasználható, zárt, integrált kézi készülékben és egy egyszer használatos teszt kazettában. A vérminta higított keverékét a kazettára kell cseppenteni és az eredmény 5 perc múlva numerikus formában látható a készülék folyadékkristályos kijelzőjén. Mivel a készüléken nem találhatók gombok vagy kapcsolók, a készülék automatikusan bekapcsol amint a teszt kazettát beillesztették. Az A1cNow+ immunoassay-t és kémiai technológiát használ az A1C és a teljes hemoglobin mérésére. Amint hozzáadta a higított vérmintát, az anti-a1c antitestekhez konjugált kék mikroszemcsék elkezdenek mozogni a reagens csíkon. A csíkon felfogott kék mikroszemcsék száma tükrözi az A1C mennyiségét a mintában.

3 A teszt teljes hemoglobin (Hb) mérésénél a mintahígító átalakítja a Hb-t met-hb-ra. A met-hb reagens csíkon mért színének intenzitása arányos a minta teljes hemoglobin koncentrációjával. Az eredményt %A1C-ben adja meg (A1C total Hb 100). Az A1cNow+ kalibrálása vérminta sorozat által történik, melyet a National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) minősített laboratóriuma minősített NGSP referencia alapján. Az ezekhez a mintákhoz használt teljes Hb kalibrációs értékeket laboratóriumi Hb analizátorral állapították meg (HemoCue Hemoglobin Test System, HemoCue, Inc., Lake Forest, CA). Az A1CNow+ teszt kalibrációja így megfelel az NGSP és egy NGSP Certified Network referencia-módszerének. Minta gyűjtése és tárolása Megjegyzés: nincs szükség éheztetésre vagy speciális diétára. Ujjbegy Az A1cNow+ teszthez 5 mikroliternyi (µl) teljes vér (1 csepp) szükséges. Ujjbegyből való vérvételhez bármilyen vérvételi berendezés alkalmazható. Alkoholos fertőtlenítés esetén a szúrás előtt győződjön meg az ujj szárazságáról. Véna punkció / mintavétel a vénás méréshez A legjobb eredmények elérése érdekében a vénás vért herapinozott csőbe kell vételezni. EDTA csövek használatakor a %A1C érték akár 0.5%-al is elcsúszhat negatív irányba. A vérmintákat jól össze kell rázni és szobahőmérsékleten tesztelni. A vénás vérminták 8 órán át használhatóak szobahőmérsékleten tárolva, míg hűtőben akár 14 napig is. Figyelmeztetések és óvintézkedések 1. Csak in vitro diagnosztikai célokra használható. 2. Figyelmesen olvassa el a szakmai eljárási útmutatót (lásd lentebb,) amely biztosítja a megfelelő vizsgálati pontosságot. 3. Ha hűtött mintával dolgozik, tegye lezárt tasakba és várja meg míg felmelegszik szobahőmérsékletre. 4. Amennyiben a kézi készüléken vagy a teszt kazettán repedést, törést talál, ne használja. 5. A teszt kazettát ne használja, ha a tasakján sérülést lát. 6. A vérmintát a kazetta kibontásától számított 2 percen belül csöppentse rá. 7. Az A1cNow+ rendszer minden alkotóeleme biológiailag veszélyes. Kezelje biológiailag veszélyes hulladékként. 8. A mintahígító készlet hígítási puffere ferricianidot tartalmaz egy pufferelt mosószeres oldattal. Ne nyelje le! Ha bőrrel vagy szemmel érintkezik, mossa ki alaposan sok vízzel. 9. Ne használja többször a teszt kazettákat vagy a mintahígító készleteket. Ne használja a készüléket más típusú kazettával vagy mintahígító készlettel! A berendezés tárolása és stabilitása A teszt kazetták, a kézi készülék és a mintahígító készletek a használattól számított három hónapig tárolhatók szobahőmérsékleten (18-28 C). Amennyiben nem használta ezeket 3 hónapon belül, dobja ki.

4 A teszt kazetták, a kézi készülék és a mintahígító készletek felhasználhatóak a dobozon vagy a csomagoláson jelzett lejárati ideig, abban az esetben, ha hűtve (2-8 C) tárolja. Minden komponenst tároljon a lezárt tasakjában, amíg fel nem használja őket. Ha le vannak hűtve, használat előtt győződjön meg arról, hogy szobahőmérsékletre melegedtek. Ne keverje össze a készüléket más típusú tasakokkal. Csomag tartalma A1CNow+ kézi készülék (1db) A1CNow+ teszt kazetta (10 db). Minden teszt kazettában a következő vegyszerek találhatók: HbA1c antitest, antigén konjugátumok amelyek az antitestekhez és membránokhoz kapcsolódnak. Mintahígító készlet (10 db), egyenként: o Mintavételező (1db) 0,37ml ferricianid pufferelt mosószeres oldattal o Vérminta gyüjtő (1db) Kézikönyv (1db) Szükséges, de nem biztosított tartozékok Ujjbegyből vett minta esetén: vérvételi tű vagy más vérvételező készülék Vénás minta esetén: lehetőség szerint heparinozott cső Géz lap vagy vattapamacs Kötszer 96%-os alkohol, vagy más színtelen bőrfertőtlenítő szer Eredmény értelmezése A %A1C tükrözi az elmúlt három hónap glükóz szabályozását. Az eredmény 50%-a az elmúlt 30 nap, 25%-a az elmúlt nap és a maradék 25%-a az elmúlt nap alapján alakul ki. 1 A vizsgálati módszertől függően laboratóriumi tesztekkel kimutatták, hogy az A1C teszt referenciatartománya % A1C, valamint 6-9% a jól vagy mérsékelten kezelt diabetes esetén. 1 A rosszul kezelt diabetes esetén ez a szint akár 20% is lehet. 8 Az American Diabetes Association (ADA) legutóbbi ajánlása azt a célt határozza meg a kezelés során, hogy a betegekben mért szint átlagosan 7% alatt legyen és egyénenként ez a lehető legközelebb legyen a normális határértékhez (kevesebb mint 6%) anélkül, hogy jelentős hipoglikémia lépne fel. Hibaelhárítás Lásd az alábbi táblázatot az A1CNow+ üzemeltetési és hibakódjainak leírásához. Üzenet Leírása és megoldása OR 1 A vérmintában lehet, hogy túl kevés hemoglobin van (kevesebb, mint 20% hematokrit), nem volt elég vér vagy a vér nem volt eléggé összerázva a mintavételezőben.* Érdemes ellenőrizni a hematokrit szintet egy másik módszerrel. OR 2 A vérmintában lehet, hogy túl sok hemoglobin van (több, mint 60% hematokrit) vagy túl sok vért adott hozzá.* Érdemes ellenőrizni a hematokrit szintet egy másik

5 OR 3 OR 4 OR 5 OR 6 módszerrel. A vérmintában vagy túl kevés A1C található vagy túl kevés vért adott hozzá. A vérmintában vagy túl sok A1C található vagy túl sok vért adott hozzá. A készülék hőmérséklete 18 C (64 F) alatt van. Ismételje meg a mérést szobahőmérsékleten (18-28 C). A készülék hőmérséklete 28 C (82 F) fölött van. Ismételje meg a mérést szobahőmérsékleten (18-28 C). <4.0 A %A1C kevesebb, mint 4%. >13.0 A %A1C több, mint 13%. QC 2 QC 6 QC 7 QC QC 50 to 51 QC 55 to 56 All other QC codes Akkor jelentkezik, ha a kazettához már adtak vérmintát mielőtt a készülékbe helyezték volna. Miután hozzáadta a mintát már ne távolítsa el és helyezze vissza a kazettát.* A minta az SMPL szöveg megjelenése előtt lett hozzáadva. Ez levon egy tesztelési lehetőséget készülék kijelzőjén. Távolítsa el és dobja ki a kazettát. A hiba elkerülése érdekében ne adja hozzá a mintát, amíg látszik a WAIT szöveg és meg nem jelenik az SMPL szöveg. A kazetta minta nélkül maradt a készülékben hosszabb ideig, mint az SMPL szöveg megjelenésétől számított 2 perc. Ez levon egy tesztelési lehetőséget készülék kijelzőjén. Dobja ki a kazettát és illesszen be egy újat amint készen áll, hogy a mintát hozzáadja. A készülék nem tudott érvényes adatot leolvasni. A mintavételezőt távolítsa el a minta hozzáadását követően és ne érjen a készülékhez, amíg a teszt fut.* Nem megfelelő minta volt a kazettára helyezve. A hiba elkerülése érdekében a vér kollektort teljesen helyezze a mintavételezőbe és rázza össze azonnal.* A minőség ellenőrzés nem felelt meg. Hívja a forgalmazó vonalát a számon. A tesztet meg kell ismételni egy másik teszt kazettával és mintahígító készlettel. E1 to E99 A készülék végzetes hibába ütközött. Hívja a forgalmazó vonalát a számon. *Óvatosan ismételje meg a tesztet egy másik teszt kazettával és mintahígító készlettel. Korlátozások Ez a teszt nem a diabetes szűrésére vagy diagnosztizálására való. Abban az esetben, ha a páciensnek magas a Hemoglobin F, Hemoglobin S, Hemoglobin C vagy más hemoglobin variánsa, akkor az A1CNow rendszer rossz eredmény hozhat. Bármilyen ok, ami csökkenti a vörösvértestek túlélését (pl.: hemolitikus anémia vagy más hemolitikus megbetegedés, terhesség, közelmúltbeli jelentős vérveszteség stb.) csökkenteni fogja a vörösvértestek glükóz felvételét. Ez a %A1C csökkenését eredményezi. A %A1C eredmények nem megbízhatóak krónikus vérszegény valamint ennek következtében változó vörösvértest élettartam esetén. Magas értékű reumás faktor alacsony eredményt okoz. Ilyenkor ajánlott az A1C mérése más alternatív módszerrel.

6 Ez a teszt nem helyettesíti a rendszeres orvosi vizsgálatot és a vércukorszint mérést. Mint minden laboratóriumi eljárás esetében, a klinikai kép és a teszt eredménye közötti nagy eltérés további kivizsgálásokat indokol. EDTA csövek használatakor a %A1C akár 0.5 %A1C-vel elcsúszhat negatív irányba. Vezérlés Minden A1CNow+ készülék több mint 25 kémiai valamint elektronikus minőségellenőrzést végez, beleértve a hardware-es és software-es hibákat (pl.: hibás kazetta behelyezés, programozási hibák) és potenciális reagens csík problémák (pl.: elégtelen minta mennyiség, érvénytelen számítások). A készülék hibakódot ad vissza, ha ezek közül a minőségellenőrzések közül valamelyik nem megy át. Ha külső minőség-ellenőrzést kíván hívja a forgalmazó vonalát a számon. A következő esetekben ajánlott a külső minőség-ellenőrzés: 1. Amennyiben laboratóriumi vagy szoba körülmények 28 C felett voltak 2. A tesztelési személyzet ki- vagy átképzésénél 3. Mindenesetben, amikor az A1CNow+ eredmények nem egyeznek más klinikai eredményekkel vagy tünetekkel. Teljesítmény Várható értékek (nem diabeteses populációban) A várható normális %A1C tartományt az A1CNow rendszer esetében 118 különböző valószínűsítetten nem diabeteses egyén vérmintájával állapították meg. A populáció 3 férfit és 85 nőt foglalt magában, 19től 76 évesekig vegyesen, az átlagéletkor 43 volt. Az átlagos eredmény 5.2% ±0.71% (1SD) volt. A szélsőértékek 3.9% és 6.5% voltak. Ezek az eredmények megközelítik a szakirodalmakban leírtakat. Linearitás Kutatásokat folytattak annak érdekében, hogy kiértékeljék a linearitást az A1CNow rendszer dinamikatartományában. Magas illetve alacsony %A1C szintű klinikai mintákat 9 különböző sűrűségű készítményre higítottak. Ezeket a mintákat legalább 5-szörös ismétlésben megvizsgálták (n=5). A mért eredményeket összevetették a várt eredményekkel és a százalékos visszanyerés szempontjából elemezték. A teszt lineáris 4 és 13% közötti %A1C szint esetén és megbízható eredményeket mutat 20 és 60% közötti hematokrit esetén. Interferencia vizsgálata/specifikusság Tanulmányokat végeztek, hogy értékeljék számos recept nélkül kapható terápiás szer valamint orális antihiperglikémiás szerek hatását, melyeket gyakran alkalmaznak a kettes típusú diabetes kezelésekor. Két különböző %A1C szintet (egy magas és alacsony; körülbelül 4 és 10%) teszteltek. Lásd a táblázatot lentebb. Interferent Bilirubin (konjugálatlan) Triglicerid Hemoglobin Vizsgált koncentráció 200 mg/dl 3000 mg/dl 500 mg/dl

7 Acetaminofen 80 µg/ml Aszkorbinsav 5 mg/dl Ibuprofen 120 µg/ml Acetilszalicil sav 1 mg/dl Gliburid (glibenklamid) 240 ng/ml Metformin (1.1-dimenthylbiguanide HCL) 25 µg/ml A kutatások kimutatták, hogy a módosult hemoglobinok nem hatottak zavaró tényezőként, beleértve a labilis glikált hemoglobint is, a két különböző szintű %A1C teszt eredményére (magas és alacsony; kürölbelül 5 és 11%). A módosult hemoglobinok és a szint melyen értékelték a következők voltak: labilis hemoglobin 1400 mg/dl glükózzal, karbamilált hemoglobin 5 mm végső sűrűségű kálium cianáttal és acetilált hemoglobin 14 mm végső sűrűségű acetilszalicil savval. Vegyes eredmények születtek a magas szintű Hemoglobin F, Hemoglobin S és Hemoglobin C tesztelése után. Az eredmények nem megbízhatóak azoknál a betegeknél, akiknél magas szintű a módosult hemoglobinok száma. Pontosság Precíziós vizsgálatra egy speciális protokoll alatt került sor. Eszerint 2 teljes vérmintát, egy körülbelül 6 %A1C (alacsony) és egy körülbelül 9 %A1C (magas) mintát teszteltek 20 napon keresztül naponta négyszer, összesen 80 vizsgálatot végeztek mintánként. A pontatlanság (mind napi mérések és a napközi mérések esetén) 3.00% CV volt az alacsony mintánál és 4.02% a magas mintánál. Ez a teljesítmény megfelel az NGSP elvárásainak. A pontossági vizsgálatokat 189 diabeteses és nem diabeteses egyénen végezték. Minden egyénen elvégezték az A1CNow+ tesztet ujjbegyből vett vérrel és összehasonlították egy vénás vérrel tesztelt másik, NGSP által hitelesített módszerrel. Az eredményeket összehasonlították egymással. Az A1C eredmények 5.0 %A1C és 12.8 %A1C között mozogtak, átlagosan 7.3 %A1C. A regresszós egyenes értékelését legkisebb négyzetek lineáris regressziójával, torzítás számítással és Bland-Altman határérték számítással végezték. Az eredmények az alábbi táblázatokban találhatók: Összehasonlító vizsgálat ujjbegyből vett mintára (Az NGSP által hitelesített módszer a Tosoh A1c 2.2 Plus) n 189 Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 5.89 (-1.83%) meredekség 1.02 Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 6.91 (-1.29%) y-metszet Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.95 (-0.56%) r 0.95 Átlagos %-os különbség -1.23% Az eredmények 99%-os pontosságot tükröznek az A1CNow+ ujjbegyből vett minta használatakor. Ez általánosan azt jelenti, hogy egy valójában 7 %A1C-s érték 6.9 %A1C-nek felel meg. Az eredmények -1.0 %A1C-től +0.8 %A1C-ig eltérhetnek a valóstól. Ez p<0.05 szignifikancia értéknek felel meg a Bland-Altman egyenesre vonatkoztatva. Összehasonlító vizsgálat vénás mintára (Az NGSP által hitelesített módszer a Tosoh A1c 2.2 Plus)

8 Egy független tanulmányban 50 vénás mintát gyűjtöttek diabeteses betegekből és mindegyik mintát kétszer teszteltek három különböző típusú teszttel (összesen hatot, két párhuzamos tesztet ugyanazon oldószerrel). A regresszós egyenes értékelését legkisebb négyzetek lineáris regressziójával, torzítás számítással és Bland-Altman határérték számítással végezték. n 2.99 Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 5.77 (-3.83%) meredekség Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 6.80 (-2.86%) y-metszet Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.84 (-1.78%) r 0.90 Átlagos %-os különbség -2.82% Az eredmények 97%-os pontosságot tükröznek az A1CNow+ vénás minta használatakor. Ez általánosan azt jelenti, hogy egy valójában 7 %A1C-s érték 6.8 %A1C-nek felel meg. Az eredmények -1.3 %A1C-től +0.9 %A1C-ig eltérhetnek a valóstól. Az A1C rendszer mind ujjbegyből vett (kapilláris) mind a vénás vérmintához használható. Várt teljesítmény laboratóriumokban Klinikai teszteket végeztek több mint 180 (többnyire diabeteses) képzetlen emberrel. Az alanyok elolvasták a használati útmutatót majd elvégeztek magukon egy A1CNow+ tesztet. Minden egyéntől vénás mintát vettek majd egy az NGSP által hitelesített laboratóriumi módszerrel megmérték a %A1Ct. Az eredményeket később összehasonlították. Képzetlen felhasználó által működtetett A1CNow+ és egy az NGSP által hitelesített módszer n 1.88 Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 6.02 (+0.33%) meredekség 0.99 Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 7.01 (+0.14%) y-metszet 0.08 Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.99 (-0.11%) r 0.93 Átlagos %-os különbség +0.12% Az eredmények azt mutatták, hogy képzetlen felhasználók azonos pontossággal tudják használni az A1CNow+ tesztet, mint a képzettek. Referenciák 1. Buris, C.A., Ashwood, E.R. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Edition, W.B. Saunders Co., Nathan, D.M., et al. The clinical information value of the glycosylated hemoglobin assay. N Engl J Med 1984; 310; The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of longterm complication in insulin-dependent diabetes melllitus. N Engl J Med 1993; 329; American Diabetes Association. Standards of medical care for patients with diabetes mellitus. Diabetes Care.1999; 22 (suppl 1): S32 S Fogh-Anderson, N., D Orazio, P. Proposal for standardizing direct-reading biosensors for blood glucose. Clin Chem 1998; 44(3); MLO Supplement. Point-of-Care Testing, 1992.

9 7. Cagliero, E., Levina, E.V., Nathan, D.M. Immediate feedback of A1C levels improves glycemic control in type 1 and insulin-treated type 2 diabetic patients. Diabetes Care 1999; 22(11): Goldstein, D.E., Little, R.R., Wiedmeyer, H.M., et al. Glycated hemoglobin: Methodologies and clinical applications. Clin Chem 1986; 32: B64-B American Diabetes Association: Clinical Practice Recommendations Diabetes Care, 2006; 29 (Suppl. 1). Nemzetközi szimbólumok Gyártó <n> tesztre elegendőt tartalmaz In vitro diagnosztikai orvosi ellátás Meghatalmazott képviselője az Európai Közösségben Hűtve tárolja (2-8 C, F)