ENZIM MODULÁCIÓ BIM SB 2001

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "ENZIM MODULÁCIÓ BIM SB 2001"

Borbála Biróné
7 évvel ezelőtt
Látták:

1 ENZM MODULÁCÓ BM B

2 NHBÍCÓ BM B REERZBL DNAMU E OMPLEX RREERZBL E + E E + P + E max ONTROLL +REERZBL NHBTOR +RREERZBL NHBTOR E O

3 . OMPETTÍ NHBÍCÓ. BM B ERENGÉ É ÖZÖTT AZ E ATÍ HELYÉÉRT, AGY... ÖLCÖNÖ ZÁRÁ MODELLE szubsztrát analóg alternatív szubsztrát termék. MODELL: lasszikus kompetitív inhibíció Az verseng -sel ugyanazon aktív hely elfoglalásáért

4 MODELLE. OMPETTÍ NHBÍCÓ 2. BM B 2. MODELL: sztérikus gátlása : kötdése egy másik köt helyhez térbelileg gátolja -nek az aktív helyhez kötését.

5 MODELLE. OMPETTÍ NHBÍCÓ 3. BM B 3. MODELL: sztérikus gátlás B : és az verseng egy közös köt helyért.

6 MODELLE. OMPETTÍ NHBÍCÓ 3. BM B MODELL: átlapoló helyek esete : és 3 köt hely képes az i, a 2 és 4 köt hely pedig az megkötésére, de egymást kölcsönösen kizárják

7 . OMPETTÍ NHBÍCÓ 4. BM B MODELLE 5. MODELL: kötõdése az enzimhezkonformáció változást okoz az enyimenés ez megakadályozza -nek az aktív centrumhoz kötõdését. lyen a végtermék gátlás (feed back inhibíció) is.

8 . OMPETTÍ NHBÍCÓ 5.. OMPETTÍ NHBÍCÓ 5. BM B

9 . OMPETTÍ NHBÍCÓ 6. BM B

10 . OMPETTÍ NHBÍCÓ 8. BM B ALTRNATÍ ZUBZTRÁTO : HEXONÁZ: glükóz, fruktóz - analógok H H HC C NH H 2 HO C O L-alanin COOH CH 2 CH 2 COOH borostyánkõsav 2H szukcinát-dehidrogenáz COOH CH CH COOH H HC fumársav O N H H C C cikloszerin P O NH2 COOH CH2 COOH malonsav EMOTERÁPA

11 . OMPETTÍ NHBÍCÓ 8. BM B p-nh 2 -benzoesav PABA átalakulás fólsavvá EMOTERÁPA FÓLA (baktérium számára szükséges) PABA analóg szulfametoxazol blokkolja a fólsav szintézist

12 i s max + + P P s max max + + kompetitiv inhibició termék inhibició alternativ v. verseng szubsztrátok max ANALÓGÁ

13 2. NEMOMPETTÍ NHBÍCÓ BM B s E + E k p E + P + + i E + s i E s E. E. és E. i E E E kp(e) max E E + E + E + E E. E

14 max max s max s NEMOMPETTÍ NHBÍCÓ 2. vagy illetve max. s i s i i i s i E E + E + E + E maxi s + ahol maxi max BM B + Az inhibitor a látszólagos max értéket változtatja meg, s (illetve m ) értékét nem befolyásolja. A i

15 2. NEMOMPETTÍ NHBÍCÓ 3. BM B max / maxi maxi + i m + max i max m max m } 0 max /

16 2. NEMOMPETTÍ NHBÍCÓ 4. Mekkora duplázza meg a L-B egyenes meredekségét? Mekkora okoz 50%-os inhibíciót? Példák: H + ionok hatása a kimotripszin esetében. tt az aktív centrumban egy proton akceptor hely van, amely inhibeálható növekv H + -ion koncentrációval. (A L-B ábrázolás tiszta nemkompetitív inhibíciót mutat, azonban ne feledkezzünk meg a ph-nak komplex enzimbefolyásoló hatásáról ). nehézfém molekulák (-H reagensek), vagy cianidok. Ezeknél azonban a hatás gyakran irreverzibilis reatinkináz ( ) kreatin/atp inhibitor: ADP i Fruktóz-bifoszfatáz (3..3.) Dfr-,6biP AMP i,.0-4

17 ALMAZELET levegn barnulás:o-diphenol oxidase katechin o-kinon (hasonló enzim: tyrosinase tyrosine melanin.) ez tovább oxidálódik barna termékekké kompetitiv inhibitor: para-hydroxybenzoesav (PHBA) ugynoda kötdik,mint a katechin nonkompetitive inhibitor: phenylthiourea rézhez kötdik, ami elengedhetetlen az enzimmködéshez

18 3. UNOMPETTÍ NHBÍCÓ BM B köt hely nem kész csak az E-hez kötdik s kp köt hely kész E + s E k p E + P + E köt hely eltorzult

19 LNEÁR EERT TP. NHBCÓ BM B k P E + E E + P l. nemkomp!!! DE + + α E + E α ahol E./E, α E./E E./E α E./E JELENLÉTE MÓDOTJA -NE E-RL TÖRTÉN DZOCÁCÓJÁT eq ( α ) ( α ) s i i s E E E E E E

20 ZUBZTRÁT NHBCÓ BM B -- A szubsztrátnak ahhoz, hogy termékképző átmeneti komplex jöjjön létre, két vagy több helyen kell, hogy az enzimhez kötődjék. Ha sok molekula van jelen, előfordulhat, hogy egy molekula az egyik, egy másik molekula pedig egy másik kötőhelyhez kapcsolódik s így inaktív komplexek jönnek létre (lássuk be, hogy ez is reverzibilis inhibíció). E - OOC CH 2 CH 2 - OOC E - OOC CH CH - OOC E - OOCCH2CH2COO - - OOCCH2CH2COO - uccinate Normal Malonate inhibition

21 ZUBZTRÁT NHBCÓ -- Nagy koncentrációnál egy molekula olyan kötõhelyhez is kapcsolódhat az enzimen, amely nem az aktív centrum része, az ilyen kötdés mintegy NEMOMPETT (v. unkompetitiv)módon módon megakadályozza a normális kötdést. --Az enzim mködéshez m szükség lehet egy aktivátor molekulára. Ha ez kapcsolódni képes a szubsztráttal, sok molekula "elvonja" az enzimtl l az aktivátort, így csökkentve annak tényleges aktivitását. BM B --ét (vagy több) szubsztrátos reakciók esetén az egyik szubsztrát feleslege lekötheti a másik szubsztrát köt helyeit, megakadályozva a szükséges második szubsztrát kapcsolódását, így megintcsak inaktív komplexek jönnek létre. -- Nagy koncentráció aspecifikus módon is gátolhatja a reakciót, például az ionersség megnövekedése miatt.

22 max + s + b ZUBZTRÁT s NHBCÓ c s abc max + s + a s BM B max m / max + + a b max max + + a b max

23 ZUBZTRÁT NHBCÓ BM B zubstrát koncentráció (mg/l) µmax0.9,s50,i0 µmax0.9,s50,i50 µmax0.9,s50,i00

24 EGYÉB HATÁO AZ ENZMATTÁRA onersség ph Hmérséklet Nyírás Nyomás (hidrosztatikai) Felületi feszültség émiai szerek (alkohol, urea, H 2 O 2...) Fény, hang, ionizáló sugárzások BM B REERZBL RREERZBL ÁLTOZÁO

25 ph hatása BM B FEHÉRJÉ: + É - TÖLTÉ OLDALLÁNCO ph (jelentségük az aktív centrumban...) ÁTTÖLTÉ MODELL -H + E E - E 2- +H + -H + +H + ATÍ ENZMHÁNYAD: Y - E - / E 0 E E - + H + E - E 2- + H + H + E - /E 2 H + E 2- /E - E 0 E+E - +E 2- MCHAEL féle ph függvények: Y + H / + / H Y Y 2-

26 ph hatása 2 BM B Y i Y Y - Y 2- Y + H / + / H + + 2! Y Y 2- ph H + optimum ( ph) ( p + p ) optimum 2 2 2

27 ph hatása 2 BM B

28 etts hatás E a H d d E i Reakciósebesség n E E i a Hőmérséklet hatása Csökken: denaturálódás kj/mol d exp G RT d irreverzibilis reverzibilis exp H RT (H-híd 2,5-29,3 kj/mol) d exp R BM B d d 900 kj/mol Nagy: kis hfokváltozásra érzékenyen reagál Mivel E 0 E a + E i E 0 E a é s k ( T) E + ahol k ( T) 2 β d k T e h max 2 a * B /R E/RT e max αte * /R + e e E/RT H /RT α kombináció (,k B,h,E 0, *) m is függ T-tl! d

29 de dt Hőmérséklet hatása a dtl is függ! ke ( ) kt a E a t E a0 e BM B 2,6 Oxigén 2,5 képzõdési2,4 sebesség 2,3 tgα E R cm 3 /min 2,2 2, 2,0,9 α tgβ H R d E,8 2,9 3, 3,3 3,5 3,7 /T*0 3

30 OPTMÁL ph kapcsolata a TABLTÁAL BM B

31 OPTMÁL hőmérséklet kapcsolata a TABLTÁAL BM B

Hasonló dokumentumok

[S] v' [I] [1] Kompetitív gátlás

[S] v' [I] [1] Kompetitív gátlás 8. Szeminárium Enzimkinetika II. Jelen szeminárium során az enzimaktivitás szabályozásával foglalkozunk. Mivel a klinikai gyakorlatban használt gyógyszerhatóanyagok jelentős része enzimgátló hatással bír