A DISZFUNKCIONÁLIS HDL MEGHATÁROZÁSA ÉS JELENTŐSÉGE KRÓNIKUS GYULLADÁSBAN

Átírás

1 DR. GAÁL KRISZTINA DE-OEC I.BELGYÓGYÁSZATI KLINIKA A DISZFUNKCIONÁLIS HDL MEGHATÁROZÁSA ÉS JELENTŐSÉGE KRÓNIKUS GYULLADÁSBAN

2 A PROTEKTÍV HDL ÁTALAKULÁSA PROINFLAMMATORIKUS HDL MOLEKULÁVÁ I. NORMÁL HDL Reverz koleszterin transzport: - A HDL molekulán található apoa-i és más lipoproteinek az érfalban, macrophagokban és a perifériás sejtekben lévő felesleges koleszterint transzportálják más lipoproteinekre és a májba újrahasznosítás illetve kiürítés céljából. Antioxidatív hatás: - Elsősorban a PON 1, LCAT, PAF-AH és a glutationperoxidáz fejti ki. PROINFLAMMATORIKUS HDL Károsodott reverz koleszterin transzport: - Klorin-, nitrogén-, és oxigén gyökök hatására az ApoA-I funkciója károsul. - A gyulladás miatt csökken a lipoprotein szintézis. Prooxidatív hatás: - A módosult ApoA-I inaktiválja a PON 1-t. - Az enzimek szintézise a gyulladás miatt csökken. - A HDL-hez prooxidáns hatású SAA és cöruloplazmin kötődik. Antiinflammatórikus hatás: -Megakadályozza az oxldl és más proinflammatórikus lipidek oxidációját. - Megakadályozza az endothel sejtek MCP-1 és más kemotaktikus molekulák expresszióját. - Csökkenti a T-sejtek és a monocyták közti kölcsönhatást. Proinflammatórikus hatás: - Elsősorban az LDL oxidációt segíti elő.

3 A PROTEKTÍV HDL ÁTALAKULÁSA PROINFLAMMATÓRIKUS HDL MOLEKULÁVÁ I.

4 Abszorbancia (45 nm) A PROINFLAMMATÓRIKUS HDL KIMUTATÁSA AZ LDL LAG TIME-JÁNAK MÉRÉSE RÉVÉN I.,35,3 LAG TIME - LDL,25,2,15,1,5 Lag time = 68 perc V max Idő (perc)

5 Abszorbancia (45 nm) A PROINFLAMMATÓRIKUS HDL KIMUTATÁSA AZ LDL LAG TIME-JÁNAK MÉRÉSE RÉVÉN II. LAG TIME - EGÉSZSÉGES HDL,35,3,25,2,15,1,5 Lag time HDL = 125% (86 perc) Lag time LDL = 1% (68 perc) V max LDL V max HDL Idő (perc) LDL Egészséges HDL

6 Abszorbancia (45 nm) A PROINFLAMMATÓRIKUS HDL KIMUTATÁSA AZ LDL LAG TIME-JÁNAK MÉRÉSE RÉVÉN III. LAG TIME - DISZFUNKCIONÁLIS HDL,4,35,3,25,2,15,1,5 Lag time HDL = 12% (7 perc) Lag time LDL = 1% (68 perc) V max HDL V max LDL Idő (perc) LDL Diszfunkcionális HDL

7 Abszorbancia (45 nm) A PROINFLAMMATÓRIKUS HDL KIMUTATÁSA AZ LDL LAG TIME-JÁNAK MÉRÉSE RÉVÉN IV. LAG TIME - PROINFLAMMATÓRIKUS HDL,4,35,3,25,2,15,1,5 V max HDL Lag time HDL = 73,5% (5 perc) Lag time LDL = 1% (68 perc) V max LDL Idő (perc) LDL Proinflammatórikus HDL

8 A MÓDSZER MEGBÍZHATÓSÁGA: LAG TIME ÉS KONJUGÁLT DIÉN KÉPZŐDÉS MÉRÉSE 1.8 LDL oxidáció magában Konjugált dién (abszorbancia 234 nm) Lag time LDL 133 perc (1%) Hem degradáció (abszorbancia 45 nm) Idő (perc) konjugált dién hem degradáci ó

9 KONJUGÁLT DIÉN KÉPZŐDÉS ÉS LAG TIME EGÉSZSÉGES HDL JELENLÉTÉBEN 3. LDL oxidáció egészséges HDL jelenlétében Konjugált dién (abszorbancia 234 nm) Lag time egészséges HDL 152 perc (114,3%) Hem degradáció (abszorbancia 45 nm) Idő (perc) konjugált dién hem degradáci ó

10 KONJUGÁLT DIÉN KÉPZŐDÉS ÉS LAG TIME PROINFLAMMATÓRIKUS HDL JELENLÉTÉBEN 4.5 LDL oxidáció RA beteg HDL jelenlétében Konjugált dién (abszorbancia 234 nm) Lag time proinflammatórikus HDL 118 perc (88,7%) Hem degradáció (abszorbancia 45 nm) Idő (perc) konjugált dién hem degradáci ó

11 Abszorbancia (45 nm) A LAG TIME ÉS A HDL KONCENTRÁCIÓ KAPCSOLATA I. LAG TIME KÜLÖNBÖZŐ HDL KONCENTRÁCIÓK MELLETT,35,3,25,2,15,1, Idő (perc) LDL 2 ug/ml 15 ug/ml 1 ug/ml 5 ug/ml

12 Lag time (%) A LAG TIME ÉS A HDL KONCENTRÁCIÓ KAPCSOLATA II. LAG TIME A HDL KONCENTRÁCIÓ FÜGGVÉNYÉBEN R 2 =,894 R 2 =, Koncentráció (ug/ml) Egészséges HDL Lineáris (RA beteg HDL) RA beteg HDL Lineáris (Egészséges HDL)

13 A PROINFLAMMATORIKUS ILLETVE A DISZFUNKCIONÁLIS HDL ELŐFORDULÁSA KÜLÖNBÖZŐ MEGBETEGEDÉSEKBEN Krónikus szisztémás gyulladással járó állapotokban: Koronáriabetegség Rosszul kontrolált 2. típusú diabetes mellitus Metabolikus szindróma Szisztémás lupus erythematosus Rheumatoid arthritis Szisztémás sclerosis Crohn-betegség Krónikus veseelégtelenség Alvási apnoe Szívtranszplantáción átesettek Akut szisztémás gyulladással járó állapotokban: Sebészeti beavatkozás Influenza vírus infekció

14 Proinflammatorikus HDL és gyulladásos paraméterek vizsgálata rheumatoid arthritisben Betegek: 1 fő (8 nő és 2 ffi) Kezelés: havonta sc. inj. formájában 6 hónapig TNF- gátló (golimumab) Kezelés eredményességének követése:., 1., 3., 6. hónapban laboratóriumi vizsgálatok és a betegségaktivitást értékelő klinikai tesztek (DAS28, ACR2, ACR5, ACR7) Célok: - TNF- gátló kezelés hatásának vizsgálata a betegség aktivitásra - A betegség aktivitás és a proinflammatorikus HDL előfordulása valamint a PON1 aktivitás közötti kapcsolat vizsgálata - A proinflammatorikus HDL és a kialakulásában szerepet játszó tényezők (myeloperoxidáz MPO; szérum amyloid A SAA) közötti asszociáció meghatározása

15 Beteg és kontrol karakterisztika I. Betegek Kontrolok P Létszám (fő) Átlagéletkor (év) 45,3 46,6 NS BMI 25,1 25,8 NS dohányzik (fő) 1 3 NS hypertonia (fő) 4 4 NS diabetes (fő) 1 1 NS anamnézisben cardiovascularis ill. cerebrovascularis történés (fő) NS Sys RR (Hgmm) NS Dias RR (Hgmm) 84,9 75,8,7

16 Beteg és kontrol karakterisztika II. Betegek Kontrolok P Összkoleszterin (mmol/l) 5,5 5,3 NS LDL (mmol/l) 3,12 2,83 NS HDL (mmol/l) 1,71 1,55 NS TG (mmol/l) 1,8 1,23 NS ApoA1 (g/l) 1,85 1,55,57 ApoB (g/l),76,76 NS Lp(a) (mg/l) 397,57 218,36 NS CRP (mg/l) 8,4 1,87,2 anti-ccp (U/l) 212,33 7,72 NS vwf Ag (%) 169,8 122,4,44

17 Betegek és kontrolok általunk mért paraméterei Betegek Kontrolok P PON aktivitás (U/l) 116,24 117,16 NS Só stimulált PON aktivitás (U/l) 221,55 29,98 NS Aryl-észteráz aktivitás (U/l) 122,4 123,77 NS PON/aryl,94,89 NS Só/aryl 1,8 1,6 NS PON fenotípus AA AA NS MPO aktivitás 1136,28 66,37,118 MPO/PON 14,25 7,47 NS MPO/aryl 9,7 4,87,81 PON/HDL-C 76,217 78,76 NS PON/aryl/HDL-C,616,62 NS Trendvonalak meredeksége,16,125 NS LAG TIME (%) 1,75 13,9 NS SAA (ng/ml) 73,79 56,28,3

18 HAQ-DI ACR kritériumot teljesítő betegek aránya (%) CRP (mg/l) ill. We (mm/óra) DAS28 A gyulladás klinikai és laboratóriumi paramétereinek változása a kezelés során CRP és We a kezelés során DAS28 változása a kezelés során Kezelési hónap CRP We Kezelési hónapok HAQ-DI változása a kezelés során ACR változása a kezelés során 1,4 1,2 1,8,6,4, Kezelési hónapok Kezelési hónap ACR2 ACR 5 ACR7

19 Trendvonalak meredeksége Enzimaktivitás (U/l) Specifikus aktivitás A HDL antioxidáns kapacitásának változása a kezelés során PON1 aktivitás változása a kezelés során Kezelési hónapok 1,95,9,85,8,75,7,65,6 A PON1 specifikus aktivitásának változása a kezelés során Kezelési hónapok PON aktivitás Sóval stimulált PON aktivitás Aryl-észteráz aktivitás PON/aryl PON/aryl/HDL-C Trendvonalak meredekségének változása a kezelés során,25,2,15,1, Kezelési hónapok

20 MPO/PON SAA/HDL-C (ug/mmol) MPO aktivitás (ng/ml) SAA (ng/ml) A HDL funkciót befolyásoló tényezők változása a kezelés hatására MPO aktivitás változása a kezelés során SAA mennyiségének változása a kezelés során Kezelési hónapok Kezelési hónapok Pro- és antioxidáns enzimek arányának változása a kezelés során Egységnyi HDL-en levő SAA mennyiségének változása a kezelés során Kezelési hónapok Kezelési hónapok

21 SAA (ng/ml) SAA (ng/ml) vwf Ag (%) Korrelációk I.: Betegség aktivitás és gyulladásos markerek DAS28 és SAA - Betegek r =, DAS28 DAS28 és vwf Ag - Betegek r =, DAS28 CRP és SAA - Betegek r =, CRP (mg/l)

22 SAA (ng/ml) PON/HDL Trendvonalak meredeksége Trendvonalak meredeksége Korrelációk II.: HDL funkció, szerkezet és enzimek,1 PON és Trendvonalak meredeksége - 3. hó PON/Aryl/HDL és trendvonalak meredeksége - 3. hó,8,6,4,2 r=,6216 -,2, 5, 1, 15, 2, -,4 -,6 PON (U/l),1,8,6,4,2 -,2 -,4 -,6 r=,4398,5 1 1,5 2 PON/Aryl/HDL PON/HDL és SAA - 1.hó PON/HDL és MPO - 1. hó r = -, PON/HDL r= -, MPO (ng/ml)

23 HDL-C (mmol/l) PON/Aryl/HDL Korrelációk III.: Betegség aktivitás és HDL funkció DAS28 és HDL-C - Betegek DAS28 és PON/aryl/HDL-C - Betegek 3,5 1,4 3 1,2 2,5 2 1,5 r=,1 1,8,6 r =-,4743 1,4,5, DAS28 DAS28

24 PON/aryl/HDL PON/aryl/HDL A terápiára adott válasz: responderek és non-responderek Responderek Non responderek 1,4 1, ,8 1,6 1,4,8 1,2 1,6,8,4,2,6,4, Kezelési hónap R1/2 R4 R5 R8 R1 R Kezelési hónap R3 R6 R9 R12

25 Összefoglalás Rheumatoid arthritisben a TNF- gátló golimumab alkalmazása eredményesen csökkentette a gyulladás hagyományos klinikai és laboratóriumi paramétereit továbbá az MPO és SAA szintjét. Az aktív gyulladásos tüneteket mutató RA-s betegeknél a HDL a betegek közel felében diszfunkcionális és a funkcionális deficit mértéke korrelál a gyulladás súlyosságával. A golimumab kezelés hatására a gyulladás csökkenésével párhuzamosan javult a HDL antioxidáns aktivitása.

26 Köszönöm a figyelmet!