WIREC. Alkalmazott gázkromatográfia I Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kh.Np. Kft.

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "WIREC. Alkalmazott gázkromatográfia I. 2010. Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kh.Np. Kft. rikker.tamas@wirec.eu www.wirec."

Szebasztián Magyar
7 évvel ezelőtt
Látták:

1 Alkalmazott gázkromatográfia I Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kh.Np. Kft.

2 Amiről szó lesz Az alkalmazás körülményei Gyógyszeranalitikai alkalmazások Környezetanalitikai alkalmazások

3 A mai nap programja Az alkalmazás körülményei Jogi elvárások Szakmai elvárások Felhasználói elvárások Eszköztár Elmélet és valóság (kompromisszumok) Gyógyszeranalitikai alkalmazások

4 Jogi elvárások Törvények és rendeletek tartalmazzák a kijelölt célokat és az alkalmazandó szakmai irányt. A cél lehet konkrét paraméter koncentrációjának határértékre történő vizsgálata, vagy döntési elv. A szakmai útmutatás kijelölhet kötelezően, vagy ajánlottan alkalmazandó szabványt, illetve megjelölheti az elvárt műszaki hátteret, alkalmasságot.

5 Műszaki elvárások Szabványok (MSZ, EN, ISO, DIN, EPA) Gyógyszerkönyv (PhHg, PhEur, USP) Élelmiszerkönyv (MÉ) Ajánlások (MADEP, ISO TR) Cikkek

6 Felhasználói elvárások A legfontosabb szempont Alapvetően az a cél, hogy a lehetőleg jól megfogalmazott kérdésre kielégítő választ adjunk. IDŐ és PÉNZ!!

7 Eszköztár ÁLTALÁNOS ELVÁRÁSOK Hatékonyság Termelékenység Rugalmasság

8 Eszköztár Fontos elvárások a korszerű gázkromatográffal szemben: - elektronikusan vezérelt hőmérséklet- és nyomásszabályozás több zónában, - számítógépes vezérlés és adatgyűjtés, - moduláris felépítés, - automata mintabeviteli eszközök csatlakoztathatósága

9 Eszköztár INJEKTOROK H T R Split/Splitless PTV (Programmed Temperature Vaporizer) On-column

10 Eszköztár DETEKTOROK ÁLTALÁNOS ELVÁRÁSOK Hatékonyság (szelektivitás) Termelékenység (érzékenység) Rugalmasság (univerzális)

11 Eszköztár DETEKTOROK U SZ É FID MS ECD TCD NPD PID -(+) +(-) + ELCD PFPD -(+) +(+) +

12 Eszköztár ANALITIKAI OSZLOPOK Az elválasztás kulcsa!! Döntő a jó választás! Gazdag választék Geometriában, fázisban Jellemző a kapilláris oszlopok használata, DE a gyógyszeranalitika és a gázanalitika még jellemzően töltetes oszlopokat használ.

13 Eszköztár

14 Eszköztár Egy elhanyagolt apróság Inlet liner

15 Eszköztár Még két apróság : Szeptum Vivőgáz

16 Eszköztár Automata mintaelőkészítő/-adagoló rendszerek

17 Elmélet és valóság (kompromisszumok)

18 Elmélet és valóság Az analitikai alkalmazások tervezésénél meg kell találni azt az elfogadható kompromisszumot, ahol a megfelelő válasz adható a feltett kérdésre, elfogadható ráfordítások árán.

19 Kompromisszumok TPH környezeti mintából

20 Gyógyszeranalitika Termékek vizsgálata Hatóanyag-tartalom Tisztaság Szermaradékok a biológiai környezetben (hatóanyag, ill. metabolitok követése a terméktől, a gyógyítandón át a környezetig)

21 Gyógyszeranalitika Hatóanyag-tartalom meghatározása Viszonylag egyszerű (gyakran nem korszerű) módszerek Jól behatárolható kémiai környezet Szigorú minőségi (dokumentálási) kötelezettség

22 Gyógyszeranalitika Hatóanyag-tartalom meghatározása X -tabletta Butil-hidroxi-anisol (BHA) tartalmi meghatározása Oldatok: Rendszeralkalmassági (BHA/BHT R>1,5), Vak (aceton), Referencia (BHA/aceton), Minta (elporított tabletta acetonban).

23 Gyógyszeranalitika Hatóanyag-tartalom meghatározása X -tabletta Butil-hidroxi-anisol (BHA) tartalmi meghatározása Kromatográfiás paraméterek Oszlop HP-624 (30m x 0,53mm x 3µm) Kolonnatér hőmérséklete 175 C Futásidő 10 min Injektor hőmérséklete 270 C FID hőmérséklete 290 C Vivőgáz (N 2 ) áramlási sebesség 10 ± 1 ml/perc Segédgáz (N 2 ) áramlási sebesség 20 ± 1 ml/perc Injektálás 1µl, split 1:50

24 Gyógyszeranalitika Norm. FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050325\025F2501.D) 5900 BHA Referencia 5800 FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050325\002F0201.D) 5700 Norm BHA RA min 7500 FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050325\005F0501.D) 7000 Norm. BHA Minta min min

25 Gyógyszeranalitika Hatóanyag-tartalom meghatározása

26 Tisztaság Oldószer-maradékok meghatározása (ICH Guideline for Residual Solvents) Gyógyszeranalitika Class 1. elkerülendő karcinogén oldószerek (pl.: benzol) QL: 1-10 mg/kg Class 2. korlátozott neurotoxin, ill. teratogén oldószerek (pl.: acetonitril) QL: mg/kg Class 3. alacsony toxicitású oldószerek (pl.: 2-propanol) QL: >5000 mg/kg Egyéb, a technológia során előforduló, nem bizonyítottan toxikus oldószerek

27 Gyógyszeranalitika Oldószer-maradék meghatározása X -tabletta 2-propanol-tartalmának meghatározása QL: mg/kg (Class mg/nap) Oldatok Rendszeralkalmassági (DKM/2-propanol DMF-ban) Referencia (2-propanol DMF-ban) Vak (DMF) Minta (darabolt tabletta DMF-ban)

28 Gyógyszeranalitika counts FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050406\001F0101.D) 2-Propanol RA FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050331\003F0301.D) counts Propanol Referencia min min FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050406\002F0201.D) FID1 A, (U:\HPCHEM\2\DATA\050331\029F2901.D) counts counts Propanol Vak Propanol Minta min min

29 Gyógyszeranalitika Oldószer-maradék meghatározása Mérés paraméterei Analitikai oszlop: HP ULTRA-2 (30m x 0,2mm x 0,33µm) Hőmérsékletprogram: 45 C (6 ), 25 C/perc 200 C Injektálás: 180 C, split 1:100, 1cm 3 gőztér Vivőgáz: H ,4 cm 3 /perc állandó térfogatáram Detektor: FID 270 C

30 Oldószer-maradék meghatározása Mintaelőkészítés Gyógyszeranalitika 0,2 cm 3 DMF (oldat) + 1,8 cm 3 H 2 O + 0,8 g Na 2 SO 4 10 cm 3 -es HS edényben Inkubáció: 80 C, 20 Transfer line hőmérséklete: 180 C Hurok hőmérséklete: 105 C Túlnyomás: 10 psi, 0,5 Huroktöltés: 0,1 Injektálás: 0,5

31 Gyógyszeranalitika Hurkos HS működése

32 Gyógyszeranalitika Oldószer-maradékok meghatározása II. Restek alkalmazás

33 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

34 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

35 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

36 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

37 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

38 Gyógyszeranalitika Oldószermaradékok meghatározása III.

39 n-heptan Q Q Q2 Gyógyszeranalitika Nagy vízoldékonyságú FID1 A, (050127C\056F0301.D) alapanyag C 7 -C 12 szénhidrogén-tartalmának 400 pa meghatározása 350 Micro Liquid/Liquid Extraction alkalmazás Column: HP ULTRA-2 (25 m x 0.2 mm x 0.33 µm) 200 Carrier gas: Hydrogen 5.0 Flow rate 1.1 ml/min 150 Oven temperature: 30 C (4 min) 30 C/min to 290 C (2min) 100 FID temperature 300 C Injector temperature: 280 C 50 Injection volume: 2 µl, pulsed split less min

40 Gyógyszeranalitika MLLE

41 Gyógyszeranalitika MLLE

42 Gyógyszeranalitika Antibiotikum meghatározása állati szövetben Cél: kiürülési (lehetséges hasznosítási) idő meghatározása QL: 50 µg/kg!! Rendkívül összetett, zavaró kémiai környezet!

43 Gyógyszeranalitika Antibiotikum meghatározása állati szövetben Megvalósítás: bonyolult mintaelőkészítés, GC-MS 25 lépés!: darálás-extrakciós standard hozzámérése-..-fehérjék kicsapása-..- SPE C 18 EC-..-acilezés-koncentrálás-..- oldószercsere GC-MS SIM üzemmódban

44 Gyógyszeranalitika Antibiotikum meghatározása állati szövetben 50% alatti visszanyerések! Számítás az extrakciós standardra vonatkoztatva: C LIN S LIN Ahol: = A LIN x C CLN x 200 x S CLN / m Sample x A CLN x C LIN : Concentration of the Lincomycin in the sample [µg/kg] A LIN : Area of Lincomycin in the sample chromatogram C CLN : Concentration of the Clindamycin in the standard solution [µg/cm 3 ] m Sample : weight of sample (g) S CLN : Slope of the calibration curve of Clindamycin [dm 3 /µg] A CLN : Area of Clindamycin in the sample chromatogram S LIN : Slope of the calibration curve of Lincomycin [dm 3 /µg] Lincomycin Clindamycin

45 Gyógyszeranalitika Tehén tőgy kromatogramja Adagolt tehén tőgy kromatogramja

46 Gyógyszer(?)analitika

47 Gyógyszer(?)analitika

Hasonló dokumentumok

A MEPS (Microextraction by Packed Sorbent) minta-előkészítési módszer alkalmazása környezeti vízminták GC-MS áttekintésében

A MEPS (Microextraction by Packed Sorbent) minta-előkészítési módszer alkalmazása környezeti vízminták GC-MS áttekintésében Novák Márton Környezettudomány MSc. Témavezető: Dr. Eke Zsuzsanna 2012 A GC-MS