Transzgénikus technológiák az orvostudományban A kövér egerektől a reumás betegségek gyógyításáig

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Transzgénikus technológiák az orvostudományban A kövér egerektől a reumás betegségek gyógyításáig"

Teréz Tóth
8 évvel ezelőtt
Látták:

1 Transzgénikus technológiák az orvostudományban A kövér egerektől a reumás betegségek gyógyításáig ELTE TTK Biológiai Intézet Budapest, okt. 7. Dr. Mócsai Attila Semmelweis Egyetem ÁOK Élettani Intézet

ELTE TTK Biológiai Intézet Budapest, 2015. okt. 7.

2 Az orvosbiológiai kutatás egyik legfontosabb kérdése: Mi az egyes gének funkciója?

3 Egyiptomi hieroglifák a Holtak könyvéből (i. e. 1240) (forrás: Az emberi inzulint kódoló gén nukleotid-sorrendje ATGGCCCTGTGGATGCGCCTCCT GCCCCTGCTGGCGCTGCTGGCCC TCTGGGGACCTGACCCAGCCGCA GCCTTTGTGAACCAACACCTGTG CGGCTCACACCTGGTGGAAGCTC TCTACCTAGTGTGCGGGGAACGA GGCTTCTTCTACACACCCAAGAC CCGCCGGGAGGCAGAGGACCTGC AGGTGGGGCAGGTGGAGCTGGGC GGGGGCCCTGGTGCAGGCAGCCT GCAGCCCTTGGCCCTGGAGGGGT CCCTGCAGAAGCGTGGCATTGTG GAACAATGCTGTACCAGCATCTG CTCCCTCTACCAGCTGGAGAACT ACTGCAACTAG (forrás:

TCTGGGGACCTGACCCAGCCGCA GCCTTTGTGAACCAACACCTGTG CGGCTCACACCTGGTGGAAGCTC TCTACCTAGTGTGCGGGGAACGA GGCTTCTTCTACACACCCAAGAC

4 Az ob/ob egértörzs

5 Az ob/ob mutáció a leptin-génben Vad típus GAG AAT CTC CGA GAC CTC CTC Glu Asn Leu Arg Asp Leu Leu ob/ob GAG AAT CTC TGA GAC CTC CTC Glu Asn Leu Stop Csonka, működésképtelen fehérje

6 Leptinhiány emberben

7 A spontán mutációk fontos adatokkal szolgálnak a szervezet működéséről Tudunk-e célzott mutációkat létrehozni?

8 Transzgénikus technológia Élő szervezetek genomjának módosítása (idegen genetikai állomány bevitele) Például: Vörösen fluoreszkáló egerek előállítása

9 Transzgénikus technológia Élő szervezetek genomjának módosítása (idegen genetikai állomány bevitele) Például: Vörösen fluoreszkáló egerek előállítása

10 Genetikailag módosított egértörzsek Egerek genomiális DNS-ének célzott módosítása minden sejtben azonos; öröklődik Legfontosabb: Knockout Gén teljes törlése

11 Orvosi Nobel-díj 2007 Mario Capecchi (USA) szül. 1937, Olaszország Martin Evans (Nagy-Britannia) szül. 1941, Nagy-Britannia Oliver Smithies (USA) szül. 1925, Nagy-Britannia (forrás:

12 A knockout egerek létrehozása

13 Géntörléses (knockout) egerek Egyes gének célzott vizsgálata Betegségek megértése, gyógyítása

14 A rheumatoid arthritis Aggresszív autoimmun ízületi gyulladás Súlyos, krónikus betegség A népesség 1-2%-át érinti Pathomechanizmus nem teljesen ismert Terápia nem megoldott

15 Autoantitest-indukált arthritis egerekben Control Arthritis Jakus et al., J Exp Med 2009 Jakus et al., Arthritis Rheum 2010 Kovács et al., J Exp Med 2014

16 Mi történik itt?

17 Az integrinek működése fehérvérsejtekben Adhesion, spreading Src-family kinases Blood IS 2 -integrins Transmigration

18 Hipotézis Blood Transmigration IS Src-family kinases

19 Az ízület szövettani vizsgálata WT Control 3 SFK KO Arthritis Control Arthritis Kovács et al., J Exp Med 2014

20 A CD18-függő migráció károsodása? 160 Intact mice Cells in synovium (thousand cells/paw) Control Arthritic 0 WT CD18 KO 3 SFK KO WT PMN KO PMN Mixed bone marrow chimeras WT + KO (competitive migration) Ly6G CD45.2 Kovács et al., J Exp Med 2014

40 Control Arthritic 0 WT CD18 KO 3 SFK KO WT PMN KO PMN Mixed

21 A CD18-függő migráció károsodása? 160 Intact mice Cells in synovium (thousand cells/paw) Control Arthritic 0 WT CD18 KO 3 SFK KO Mixed bone marrow chimeras WT + KO (competitive migration) Relative migration (WT CD45.1 = 1) 2 1 NINCS intrinsic migrációs károsodás! 0 WT CD18 KO 3 SFK KO Kovács et al., J Exp Med 2014

22 A sejtvándorlás feltételei A sejtek migrációs képessége A migrációt irányító kemotaktikus grádiens

23 Src-kinázok hiányában csökken a szinoviális térben a MIP-2 és az LTB 4 szintje MIP-2 (pg/limb) Control Arthritic LTB4 (pg/limb) Control Arthritic 0 WT 3 SFK KO 0 WT 3 SFK KO Kovács et al., J Exp Med 2014

24 Src-kinázok hiányában károsodik a neutrofil granulociták MIP-2 és LTB 4 leadása MIP-2 (pg/10 6 cells) Control IC LTB4 (ng/10 6 cells) Control IC 0 WT 3 SFK KO 0 WT 3 SFK KO Kovács et al., J Exp Med 2014

25 Javasolt mechanizmus Blood Transmigration IS Src-family kinases MIP-2 LTB 4... Src-family kinases Kovács et al., J Exp Med 2014

26 Sejt/molekuláris biológus vs. egér biológus Cell/molecular biologist Mouse biologist

27 A labor tagjai Jakus Zoltán Balázs Bálint Kertész Zsuzsa Győri Dávid Futosi Krisztina Simon Edina Kovács Miklós Németh Tamás Duleba Mónika

28 Támogatók

Hasonló dokumentumok

Doktori. Semmelweis Egyetem

Doktori. Semmelweis Egyetem a Doktori Semmelweis Egyetem z Hivatalo Dr Helyes Zsuzsanna egyetemi docens, az MTA doktora Dr Dr tagja Szi Dr az MTA doktora Dr, az MTA rendes, PhD Budapest 2012 A neutrofil granuloci PhDvel foglalkoztam